Video: ¿Cuál es el propósito de usar ddNTP?
2024 Autor: Stanley Ellington | [email protected]. Última modificación: 2023-12-16 00:15
DdNTP se refiere a Didesoxinucleótidos trifosfatos que se utilizan en el método didesoxi de Sanger para producir diferentes longitudes de cadenas de ADN para la secuenciación del ADN. Esto da como resultado la terminación del proceso de polimerización del ADN (o alargamiento del ADN) porque este proceso necesita un grupo 3'-OH para continuar.
Por lo tanto, ¿por qué se utilizan los ddNTP en la secuenciación?
Didesoxinucleótidos son inhibidores de la ADN polimerasa que alargan la cadena, usó en el método Sanger para ADN secuenciación . Los didesoxirribonucleótidos no tienen un grupo hidroxilo 3 ', por lo que no puede producirse un alargamiento adicional de la cadena una vez que este didesoxinucleótido está en la cadena. Esto puede conducir a la terminación del ADN. secuencia.
De manera similar, ¿los ddNTP se adjuntan a los dNTP? Uno o más de los dNTP están etiquetados radiactivamente para ayudar a visualizar los productos de replicación. Finalmente, cada tubo recibe uno de los cuatro nucleótidos especiales llamados didesoxinucleótidos ( ddNTPs ). Sin embargo, una vez incorporada, la ADN polimerasa no puede extender más la cadena porque necesita un 3'-OH para adjuntar al siguiente nucleótido.
De manera similar, uno puede preguntarse, ¿cómo detienen los ddNTP una reacción de secuenciación?
Cuando está presente en pequeñas cantidades en reacciones de secuenciación , trifosfatos de didesoxirribonucleósido ( ddNTPs ) terminar el reacción de secuenciación en diferentes posiciones en las hebras de ADN en crecimiento. Los ddNTP detienen una reacción de secuenciación porque: hacen que la ADN polimerasa se desprenda de la hebra molde. C.
¿Qué técnica con didesoxinucleótidos podría utilizarse?
La secuenciación de Sanger es una método de secuenciación de ADN basada en la incorporación selectiva de terminación de cadena didesoxinucleótidos por la ADN polimerasa durante la replicación del ADN in vitro. Desarrollado por Frederick Sanger y sus colegas en 1977, fue el más usó secuenciación método durante aproximadamente 40 años.
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