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¿Cómo se inserta un gen en un plásmido?
¿Cómo se inserta un gen en un plásmido?

Video: ¿Cómo se inserta un gen en un plásmido?

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Video: Inserción del gen de interés al plásmido 2024, Noviembre
Anonim

Los pasos básicos son:

  1. Corta el plásmido y "pegar" en el gene . Este proceso se basa en enzimas de restricción (que cortan el ADN) y ADN ligasa (que se une al ADN).
  2. Insertar los plásmido en bacterias.
  3. Crecer mucho plásmido -transportando bacterias y utilizándolas como "fábricas" para producir la proteína.

Además, ¿cómo se puede insertar un gen en un plásmido GCSE?

está insertado en un plásmido utilizando enzimas ligasa. los plásmido va dentro una célula bacteriana. la bacteria transgénica se reproduce, resultando en millones de bacterias idénticas que producen insulina humana.

Además, ¿cómo se subclona un gen? Pasos básicos para Subclonación Libera y purifica su inserto del vector principal, liga este inserto en un vector de destino preparado, transforma esta reacción de ligación en células bacterianas competentes. Luego, examina las celdas transformadas para el inserto.

Teniendo esto en cuenta, ¿cuáles son los 4 pasos de la clonación de genes?

En los protocolos clásicos de clonación por ligadura y digestión con enzimas de restricción, la clonación de cualquier fragmento de ADN implica esencialmente cuatro pasos:

  • aislamiento del ADN de interés (o ADN diana),
  • ligadura
  • transfección (o transformación) y.
  • un procedimiento de cribado / selección.

¿Cómo se amplifica un plásmido?

Procedimiento experimental

  1. Ejecute PCR y purifique el producto de PCR: Ejecute PCR para amplificar su inserto de ADN.
  2. Digerir tu ADN:
  3. Aísle su inserto y vector mediante purificación en gel:
  4. Ligue su inserto en su vector:
  5. Transformación:
  6. Aislar el plásmido terminado:
  7. Verifique su plásmido mediante secuenciación:

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