¿Cómo funciona la clonación de Gibson?
¿Cómo funciona la clonación de Gibson?

Video: ¿Cómo funciona la clonación de Gibson?

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Video: Clonación Gateway y Gibson 2024, Noviembre
Anonim

los Clonación de Gibson Master Mix consta de tres enzimas diferentes dentro de un solo tampón. Cada enzima tiene una función específica y única para la reacción: Exonucleasa T5: crea protuberancias 3 'de ADN monocatenario al masticar desde el extremo 5' del ADN. Los fragmentos de ADN complementarios pueden aparearse posteriormente entre sí.

Teniendo esto en cuenta, ¿cómo funciona Gibson?

los Gibson El método Assembly® es un procedimiento de clonación que permite la clonación de dos o más fragmentos sin necesidad de digestión con enzimas de restricción o sitios de restricción compatibles. En cambio, los extremos superpuestos definidos por el usuario se incorporan a los fragmentos para permitir la unión perfecta de los fragmentos adyacentes.

Del mismo modo, ¿qué hay en Gibson Assembly Master Mix? los Mezcla maestra de clonación de Gibson consta de tres enzimas diferentes dentro de un solo tampón. Cada enzima tiene una función específica y única para la reacción: Exonucleasa T5: crea protuberancias 3 'de ADN monocatenario al masticar desde el extremo 5' del ADN. Los fragmentos de ADN complementarios pueden aparearse posteriormente entre sí.

De esta manera, ¿cómo funciona el montaje de Golden Gate?

puerta Dorada clonación o La asamblea de Golden Gate es un método de clonación molecular que permite a un investigador ensamblar simultánea y direccionalmente múltiples fragmentos de ADN en una sola pieza utilizando enzimas de restricción de Tipo II y ADN ligasa T4. Esta el montaje es realizado in vitro.

¿Cómo funciona la clonación de Gateway?

los Clonación GATEWAY La tecnología se basa en el sistema de recombinación específico del sitio utilizado por el fago 1 para integrar su ADN en el E. Los sitios attL y attR que rodean el sitio de recombinación del ADN del fago insertado, específicamente durante el evento de escisión para reformar el sitio attP en el fago 1 y el sitio attB en el E.

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